Harley Quinn (KALEY CUOCO) hat den Joker (ALEX TUDYK) zur Strecke gebracht, und Gotham City – oder was davon noch übrig ist – gehört endlich ihr. Gotham ist nach dem gewaltigen Erdbeben, das durch den Einsturz von Jokers Turm verursacht wurde, zu einer verlassenen Brache geworden, die in Trümmern liegt. Harleys Feier in diesem neu geschaffenen Chaos wird jäh unterbrochen, als sich Pinguin (WAYNE KNIGHT), Bane, Mr. Freeze, der Riddler und Two-Face zusammenschließen, um die Ordnung in der kriminellen Unterwelt wiederherzustellen. Die Gruppe nennt sich die „Injustice League” und hindert Harley und ihre Truppe daran, als Topschurken die alleinige Kontrolle über Gotham zu übernehmen.